湿转电压（湿电电压不上的原因）

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...24KDa,14KDa)时,电泳和转膜(湿转)各需要多长时间较好?

1、半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 20-30分钟 转膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜 14KD 电泳条件： 我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。

2、湿转条件为100mv 时间为50-80分钟都行。。关键是采用的配胶浓度10%以上，12% 15%。

3、如果是湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了。转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。

4、转膜的条件是恒流300mA转60分钟。使用转膜设备（湿转Bio-Rad）在恒流300mA转60分钟即可，该条件不止用于13kd的蛋白转膜，相同条件也可用于数个30-70KDa的蛋白，都能成功转上。蛋白又名鸡子白，异名鸡卵白（《别录》）、鸡子清（《食疗本草》）。为雉科动物家鸡的蛋白，是常见的食品。

WB蛋白电泳实验步骤,液体的配置及相关问题解答

试剂配置与选择电泳液： 以100ml为基准，准备Tris 03g， 甘氨酸 18g， SDS 1g。转膜液： Tris 03g， 甘氨酸 14g， 800ml ddH2O和200ml甲醇混合。TBST（10×）： Tris 11g， NaCl 40g， 500ml ddH2O。

首先需要准备样品，如细胞粉碎液或组织匀浆等。样品需在最佳条件下储存和处理，避免其蛋白质失活和降解。通常情况下，可以将样品加入SDS-PAGE样品缓冲液中，然后进行煮沸、离心等操作以去除残留颗粒和气泡等。SDS-PAGE电泳 将样品加入SDS-PAGE孔中，通常使用10%-15%的梯度凝胶进行电泳分离。

实验流程： 样本制备：了解目标蛋白信息，裂解细胞，定量蛋白，变性处理，调整细胞处理条件以激活或抑制蛋白表达。 凝胶电泳：准备凝胶及电泳液，上样，电泳分离蛋白。 蛋白转膜：使用湿转、半干转或干转方法将电泳分离的蛋白转移到膜上。 封闭：使用高蛋白封闭剂防止非特异性结合。

样品制备 - 收集目标蛋白质的来源样本，如细胞裂解液或组织提取液。- 确保样品在冰上处理，以保持蛋白质的稳定性和活性。- 将样品与SDS-PAGE样品缓冲液混合，加热至煮沸，然后离心以去除细胞碎片和不溶物质。 SDS-PAGE电泳 - 准备适当浓度的SDS-PAGE凝胶，通常为10%-15%的梯度凝胶。

1.5mm电泳与转膜时间

1、分钟够了。5mm的胶，湿转，恒流300ma，转40分钟，蛋白从30KD-120KD基本上都转到膜上了。你的目的蛋白是38KD不算大，转30分钟够了的。在转膜过程中注意观察电压的变化，如果在2小时时电压保持在100v以上，则2小时足矣，如果是80v左右，则适当延长为5或三小时。

2、分钟。根据化工仪器网资料显示，300kd转膜时间在90分钟，0的胶厚度，要是0.75也行，但5mm的厚胶要时间长一些。转膜是将电泳后分离的蛋白质转移到固相载体（PVDF膜或NC膜）上的过程。

3、另外同样量的蛋白在厚的胶里面跑电泳，转膜的时间最好延长一些，保证蛋白完全转到膜上。胶越厚转膜越慢，但是太薄的话又容易破，看你自己的水平而定了。

4、转膜时间取决于电场强度、膜孔大小和溶液条件等。通常转膜时间介于几分钟到数小时之间。 扩散转膜：扩散转膜是通过溶质在浓度差的驱动下从一个区域扩散到另一个区域的过程。对于大分子，扩散速率较低，因此转膜时间可能需要几小时甚至几天。需要注意的是，转膜时间还可能受到实验要求的限制。

5、蛋白分子量大小分别为21kd、28kd，用的是湿转，请问多大电流，多长时间比较合适？解分子量比较小，最好是用干转，湿转效率太高，易转过了。干转的话，用5 A/cm2， 30min就应该够了。湿转，按照bio-rad的说明，用100mA，也得要半个多小时吧。

6、分子量小于100kda宜减小电流，可用160-180ma转膜90min分离的蛋白分子量小于100kda的选择转膜时间为120min分子量大于100kda的选择转膜时间为150min。转膜，是将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体上，同时维持其相对位置和分辨率的过程。

加湿器换能片电压是多少

1、总之，加湿器换能片的电压通常为12V或24V，了解和注意这一电压值对于加湿器的正常使用和保养至关重要。建议在操作前查阅说明书或联系制造商进行咨询，确保正确安装和使用，以保证加湿器的效果和安全。

2、我认为加湿器震荡片的电压是150-180左右。

3、另一组是35v的，换能片和普通计算器上面的蜂鸣片是不同的，可以在您附近的家电维修问问应该有，没有可以联系我，我有。770222996。

4、加湿器换能片的电压价格因品牌、型号和地区差异而异。一般来说，价格大概在几十元至几百元不等。具体价格还需根据具体情况而定。以下是关于加湿器换能片电压价格的 品牌和型号差异：不同品牌和型号的加湿器，其换能片电压的价格也会有所不同。

5、市面上的加湿器线路板都是一样，电压都在28V供电以上，电流1A以上，（工作时，调节电压在28V-50V之间）估计你是这个原因，供电电压或功率不够所造成。问题疑点－－ 谐振频率（MHz） 7。

6、美的S20U-M加湿器的工作原理基于压电效应。其核心组件是换能片，这是一种特殊的黑晶喷涂散热片，其下部覆盖着具有压电特性的材料。当高频（7MHz）的振荡电压被施加到换能片上时，电能巧妙地转化为机械能。这个转化过程使得换能片振动，从而将水分解为极其微小的颗粒，这些颗粒直径仅为1~5微米。

索莱宝快速转膜液时间确定

索莱宝快速转膜液时间确定方法：转完膜后的蛋白胶再重新染色。湿转的话，80V，2h，足以，想确定最佳转膜时间的话，可以将，看看的蛋白是否还在上面，蛋白都不会转的很完全，不过，做WB鉴定足以，无多大区别看个人习惯，恒流时，电压逐步增大，恒压时，电流逐步减小。

需要直流电流（DC）来执行转膜过程。由于转膜过程极其复杂，所需电流量可能会有所不同。为了完成转膜过程，应该提供2-5A的直流电流。

蛋白分子量为100kd,湿转,恒压还是恒流好?数值多少较合适?

蛋白分子量为100KD的情况下，恒压100V的设置是比较合适的。在电泳过程中，这一电压可以确保样品在较长时间内的稳定迁移，从而获得清晰的条带。对于100KD的蛋白分子，恒压操作可以提供足够的电场强度，使它们能够顺利地迁移，而不会因为过高的电流而导致蛋白质结构受损。湿转技术在电泳结束后至关重要。

V电压跑45min左右 3． 转膜（半干转）1） 将胶小心从板上拿下来，置于transfer buffer 中（1×transfer buffer中加入20%甲醇）洗掉running buffer，15min。2）将NC膜置于100%甲醇中激活一分钟。3）将胶转到NC膜上，注意防止气泡（可用温度计之类的赶掉气泡），17V恒压20min。

小分子量的蛋白半干转效果比较好，大分子量（100KD）以上建议湿转。具体转膜条件需要多摸一下。30-80KD半干转恒流1mA/cm2，1-5h 都可以，大分子湿转100V，5h以上应该可以，转完膜丽春红染出的条带比较清楚的话，一般都能有结果。

以Yrdimes半干转印槽为例，将滤纸、转印棉用缓冲液浸润后，与胶块一起夹到转印槽内，通电进行电转印。一般来说湿转相对半干转印速度上要慢，设备成本上半干转印槽也相对更贵。通常小分子量的蛋白半干转效果比较好，大分子量（100KD）以上建议湿转。

kda分子量的蛋白做法如下：200KD可以试试下面的条件：1，上样50ug， 浓缩胶5%，分离胶8%，恒压70V浓缩胶，90V分离胶。2，转膜湿转，200mA， 100分钟。3， 5% no fat milk TBS 室温封闭2小时。4，一抗4度过夜，二抗室温2小时。GAPDH 的转膜时间可以为60分钟。

这种小分子量的蛋白 半干转就可以了 30KD 电泳条件： 我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。10%-12%的分离胶 半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜 一般是0.04mA 30-40分钟 转膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜 24KD 电泳条件： 我们实验室的100V恒压跑。

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